SARS-CoV-2 Triplex PCR KIT

SARS-CoV-2 Triplex PCR kit současně detekuje tři cíle v protein kódujících oblastech ORF1ab, ORF8 a N, každý na samostatném detekčním kanálu. Detekce 3 oblastí zvyšuje specifitu testu a činí jej stabilním proti potenciálním mutacím viru v oblastech, kde se vážou primery nebo sondy.

Jako interní kontrolu kvality extrakce RNA a reverzní transkripce test používá specifickou sadu primerů a fluorescenčních sond pro transkript jednoho z lidských "housekeeping genů".

Pozitivní kontrolní reakce používá směs in vitro transkribovaných RNA odpovídajících cílovým oblastem genomu SARS-CoV-2.

Technické specifikace

Princip testu	Jednokrokové reakce reverzní transkripce a PCR v reálném čase s detekcí pomocí fluorescenční sondy.
Výsledky testu	Kvalitativní
Materiál vzorku	nazofaryngeální výtěry, orofaryngeální výtěry a vzorky slin v transportním médiu nebo roztoku NaCl
Analytická citlivost	1000 kopií SC2 genomické RNA na 1 ml vzorku
Diagnostická citlivost	100%
Diagnostická specifita	100%
Velikost kitu	100 testů
Obsah kitu	PCR-Mix SC2 ve 2ml zkumavce Taq DNA-polymeráza s reverzní transkriptázou Pozitivní kontrola Negativní kontrola
Kontroly zahrnuté v kitu	• endogenní interní kontrola • pozitivní kontrola • negativní kontrola
Validované metody extrakce	Magnetic DNA/RNA Extraction kit (Astra Biotech GmbH) Prime DNA/RNA Extraction kit (Astra Biotech GmbH)
Validované termocyklery	Qiagen Rotor-Gene Q Corbett Research Rotor-Gene 3000/6000 Bio-Rad CFX96/CFX96 Touch Roche Light Cycler 96 DNA-Technologie DTprime/DTlite Sacace SaCycler
Detekční kanály požadované pro PCR cyklery:	ROX, HEX, Cy5, FAM
Skladování	- 18...- 30 °C, skladování při ≤+25 °C je povoleno po dobu nejvýše 5 dnů
Schválení	pro in vitro diagnostiku

Vlastnosti:

Pokročilý návrh testu
• tři specifické cíle SARS-CoV-2 vybrané z nejméně proměnlivých oblastí v genech ORF1ab, ORF8 a N

• více cílů zvyšuje robustnost testu v případě možných vznikajících mutací v regionech, kde se vážou primery nebo sondy

Kontrola celého diagnostického procesu
• endogenní interní kontrola (transkript jednoho z lidských «housekeeping genů») umožňuje sledovat kvalitu odběru vzorků, RNA extrakci, reverzní transkripci a PCR amplifikaci, stejně jako detekční reakce

• pozitivní kontrola (in vitro transkribovaná RNA cílových oblastí) umožňuje sledovat kvalitu reverzní transkripce a PCR amplifikační a detekční reakce

• negativní kontrola umožňuje sledovat případy možné kontaminace

Jednozkumavkový formát
• současná detekce tří cílů + interní kontrola v jedné zkumavce

• interní kontrola je součástí master mixu - není nutné žádné další pipetování